2024-11-08 03:11:43
所描述的實施例**是本申請一部分實施例,而不是全部的實施例?;诒旧暾堉械膶嵤├绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護的范圍。實施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液;整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中,控制發(fā)酵溫度35℃,通風(fēng)比1∶,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,溶氧維持在20%。無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞培養(yǎng)提供了純凈的背景。北京DMEM/F12培養(yǎng)基哪個好
本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖,a:水稻成熟胚愈傷**;b:水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率;a中bar=;圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖;圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長狀況的比較效果圖,a:不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無菌苗生長情況;b1、c1和d1:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b2、c2和d2:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b3、c3和d3:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b4、c4和d4:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b5、c5和d5:1/;b6、c6和d6:1/;b7、c7和d7:;b8、c8和d8:;a、b、c和d中bar=;圖10是對在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計的比較效果圖。具體實施方式下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實施例一,本實施例廣適性植物**培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno32662mg、。北京DMEM/F12培養(yǎng)基哪個好減血清培養(yǎng)基減少了實驗中的血清干擾。
擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)6-9d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**,在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛,顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%。如圖5所示。培養(yǎng)實例5和對比培養(yǎng)例5的誘導(dǎo)結(jié)果比較:用上述方法進(jìn)行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導(dǎo)時,cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%,但cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的愈傷**出愈時間比ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基提前至少1d;在相同培養(yǎng)條件下,與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比,經(jīng)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)的葉片團塊狀愈傷**更大、誘導(dǎo)的根愈傷**更多。如圖5所示。培養(yǎng)實例6:本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)實例6與培養(yǎng)實例5不同的地方在于,步驟(1)將;步驟(2)將2,;步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片,用手術(shù)剪刀將無菌葉片剪成,用鑷子將其平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基;步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根,cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為:本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚,葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**,愈傷**誘導(dǎo)率為100%,且在愈傷**團塊上已開始產(chǎn)生多個嫩綠色的不定芽;本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**。
3)培養(yǎng)方法:將配制的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中,用移液**吸取帶有無菌水的無菌種子,吹打在無菌濾紙上,用無菌尖頭鑷子將種子均勻點播在培養(yǎng)基上;于溫度22-24℃、濕度50-70%、光照強度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯,蓮座葉均已伸展,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均主根長為。如圖1所示。對比培養(yǎng)例1:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例1,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯,蓮座葉部分伸展,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均主根長為。如圖1所示。培養(yǎng)實例1和對比培養(yǎng)例1的培養(yǎng)結(jié)果比較:哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)16d時,與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,主要表現(xiàn)為蓮座葉長勢更好、根系更為發(fā)達(dá)。如圖1所示。F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學(xué)研究中表現(xiàn)出優(yōu)越的性能。
NalgenePET/PETG方形培養(yǎng)基瓶NalgeneSquarePET和PETG培養(yǎng)基瓶是當(dāng)今制*,診斷和生物技術(shù)市場中理想的培養(yǎng)基、血清、緩沖液、試劑儲存和運輸容器。這些耐用、輕質(zhì)且防碎的聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)和厚壁抗破裂乙二醇改性(PETG)瓶兼容高密度聚乙烯(HDPE)密封蓋,具有三種兼容的密封蓋類型;標(biāo)準(zhǔn)螺紋密封蓋,防盜密封蓋和帶隔膜的密封蓋。獨特的Nalgene瓶和密封蓋設(shè)計無需襯墊或墊圈即可提供可可靠的防漏性能,并提供有效的氧氣和二氧化碳屏障,以維持試劑的適當(dāng)pH值。這些包裝瓶可以從科研擴展到生產(chǎn),同時提供實驗室使用的包裝瓶,以及手動和自動化灌裝線。Nalgene培養(yǎng)基瓶的設(shè)計和制造符合我們保證**和防漏的嚴(yán)格要求,原始樹脂具有DMF編號,且符合以下法規(guī)規(guī)范:USPClassVI,USP,和ISO10993-3。產(chǎn)品無細(xì)胞毒性,無熱原,無致突變性,采用動物源性成分(ADCF)?材料制成,有助于確保成分純度。對于適用于特定Nalgene瓶的監(jiān)管要求和認(rèn)證,請聯(lián)系Nalgene法規(guī)支持部門?;瘜W(xué)品會影響塑料的強度、柔韌性、表面外觀、顏色、尺寸或重量,因此您應(yīng)仔細(xì)選擇適合您特定用途的材料。通常,與PETG相比,PET樹脂對稀酸、脂肪醇、脂肪烴和干鹽的耐受性更強。F12培養(yǎng)基在組織工程和再生醫(yī)學(xué)中有廣泛應(yīng)用。西藏RPMI1640培養(yǎng)基市場報價
DMEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實驗研究。北京DMEM/F12培養(yǎng)基哪個好
無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿足動物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的**素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉*細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2)促生長因子及***:針對不同細(xì)胞添加不同的生長因子。***也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些***是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素。3)酶**劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶**劑,以終止酶的消化作用,達(dá)到保護細(xì)胞的目的。**常用的是大豆胰酶**劑。4)結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護細(xì)胞免受機械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。北京DMEM/F12培養(yǎng)基哪個好