2024-10-29 01:10:30
流加質(zhì)量百分比濃度為20%的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢?,流加消泡劑消泡。實施?一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖100g/l,酵母浸膏25g/l,k2hpo41g/l,mgso4·7h2o70mg/l,2-羥基乙胺20mg/l,cecl35mg/l,mnso4·h2o2mg/l,feso4·7h2o2mg/l,vb15mg/l,生物素5μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸7g/l,尿素2g/l,殼聚糖50mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液;整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中,控制發(fā)酵溫度35℃,通風比1∶,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,溶氧維持在20%,流加質(zhì)量百分比濃度為20%的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢ィ骷酉輨┫?。實施?一、cecl3稀土鹽對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。RPMI1640培養(yǎng)基能夠維持細胞的代謝活性。陜西DMEM高糖培養(yǎng)基采購
將蒸過的原料置于室溫下過夜,未被殺死的孢子便發(fā)芽生長,芽孢發(fā)育成營養(yǎng)細胞,再30min便可殺死。如此連續(xù)反復進行2-3次,亦可達到徹底**的目的。3、分批**的操作分批滅歇是在所用的發(fā)酵罐或其他培養(yǎng)裝置中進行的,它是在配制罐中配好培養(yǎng)基后,通過**管道輸入發(fā)酵罐等培養(yǎng)設備中,然后開始**。在進行培養(yǎng)基的間歇**之前,通常先將發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置的分空氣過濾器進行**,并且用空氣將分過濾器吹干。開始**時,應先放去夾套或蛇管中的冷水,開啟排氣管閥,通過空氣管向發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基通入蒸汽進行加熱,同時,也可在夾套內(nèi)通蒸汽進行間接加熱。當培養(yǎng)基溫度升到70℃左右時,從取樣管和放料管向罐內(nèi)通入蒸汽進一步加熱,當溫度升至120℃,罐壓為1*105Pa(表壓)時,打開接種、補料、消泡劑、酸、堿等管道閥門進行排汽,當然在保溫過程中,應注意凡在培養(yǎng)基液面下的各種進口管道都應通入蒸汽,而在液面以上的其余各管道則應排放蒸汽,這樣才能不留死角,從而保證**徹底。保溫結(jié)束后,依次關閉各排汽、進汽閥門,待罐內(nèi)壓力低于空氣壓力后,向罐內(nèi)通入無菌空氣,在夾套或蛇管中通冷水降溫,使培養(yǎng)基的溫度降到所需的溫度,進行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。上海RPMI1640培養(yǎng)基一般多少錢MEM培養(yǎng)基是細胞生物學研究中的基礎培養(yǎng)基之一。
一)、實驗室種子培養(yǎng)基**方法1、高壓蒸汽**鍋、手提式**鍋。容量小。2、立式或臥式**鍋。容量較大,一般能裝幾十瓶或幾百瓶。3、**柜。要和蒸汽鍋爐配套,用于大量種瓶培養(yǎng)基的**,一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。(二)、培養(yǎng)基的分批**1、定義:將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐中,用蒸汽加熱,使培養(yǎng)基和設備同時**的一種**方式,又稱實罐**。2、**過程過程包括升溫、保溫和冷卻等三個階段,各階段對**的貢獻:20%、75%、5%。培養(yǎng)基的升溫可由兩種方式實現(xiàn):間接加熱,在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱;直接加熱,在培養(yǎng)基中直接通入熱蒸汽加熱。**過程中加熱和保溫階段的**作用是主要的,而冷卻階段的**作用是次要的,一般很小,可以忽略不計。此外,還應指出的是,應當避免長時間的加熱階段,因為加熱時間過長,不僅破壞營養(yǎng)物質(zhì),而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質(zhì)的生成,從而影響培養(yǎng)過程的順利進行。在實際生產(chǎn)中,也可能遇到所供蒸汽不足、溫度不夠高的情況,這時可以適當延長**時間。生產(chǎn)上甚至有用100℃蒸煮而達到徹底**的實例。如要做固體曲而沒有高溫蒸汽時,可將原料用100蒸汽蒸30min,殺死其中的營養(yǎng)細胞,但孢子與**的芽孢沒有被殺死。
第三節(jié)培養(yǎng)基的高壓**及效果驗證消毒**在醫(yī)學實踐上有著重要意義。它可切斷傳播途徑、控制***擴散造成的危害;也可殺滅物品或器皿上的**,防止*****;在醫(yī)學微生物檢驗的領域中,消毒**是保正***的病原學檢驗不受外來微生物污染的前提。(一)術語消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐(antisepsis)和無菌(asepsis)是常用術語。下面就術語概念加以敘述。(1)**。是用適當?shù)奈锢砘蚧瘜W手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。本法適用于制劑、原料、輔料及**器械等物品的**。(如外科器械、注射器、基礎培養(yǎng)基**等。)(2)消毒。是破壞物體上活的病原微生物的方法,但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡體溫計、新潔爾滅液擦拭檢查臺等。用于消毒的化學物品稱消毒劑(dis-infectant)。一般而言,消毒對象是指物體而不是機體。(3)防腐。直接使用防腐劑(antiseptics)破壞或**活的病原微牛物的方法。如外科手術前碘液擦洗皮膚、雙氧水清創(chuàng)傷口或**肥皂清冼雙手等。(4)無菌。防止***病原體進入****或物品的操作技術稱無菌操作。無菌即為不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過濾等。減血清培養(yǎng)基減少了血清對細胞培養(yǎng)的干擾。
c、結(jié)果為:在用未調(diào)ph液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基;在用ph調(diào)至,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/、、1/、;不論是否調(diào)ph至,cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于ms液體培養(yǎng)基;不論是否調(diào)ph至,1/2cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于1/2ms液體培養(yǎng)基。如圖9和圖10所示。說明,1/2cs液體培養(yǎng)基和cs液體培養(yǎng)基應用于植物水培時,不論是否調(diào)節(jié)ph至,均能獲得很好的培養(yǎng)效果,克服了傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基必須調(diào)節(jié)ph后才適用于植物水培的缺點。**后說明的是,以上實施例*用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制,盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明,本領域的普通技術人員應當理解,可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換,而其不脫離本發(fā)明技術方案的宗旨和范圍,則均應涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當中。無血清培養(yǎng)基適用于需要無血清環(huán)境的細胞。中國臺灣Ham's F12培養(yǎng)基進口
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體外培養(yǎng)時,一定的濃度范圍條件下,葡萄糖主要經(jīng)糖酵解循環(huán)轉(zhuǎn)化成乳酸來為細胞提供能量。(氨基酸)氨基酸在細胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:①是蛋白質(zhì)的基本組成單位,用于合成蛋白質(zhì)和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸還具有獨特的生理作用,如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用,丙氨酸和谷氨酰胺參與細胞內(nèi)氨的運輸?shù)龋虎芸赊D(zhuǎn)變成糖類和脂肪,參與氧化供能。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,D型氨基酸不能被利用。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但有些必需氨基酸是細胞不能自身合成的,必須依靠外源的細胞培養(yǎng)液提供。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通過轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來,但是在細胞培養(yǎng)基中添加適當濃度的非必需氨基酸可以減輕細胞在合成方面的負擔,提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。絕大部分細胞對谷氨酰胺有較高的要求,可能因其不僅是細胞的主要氮源,且可作為細胞生長的能源物質(zhì)和嘌呤、嘧啶核苷酸的前體,另外還可直接作為細胞增殖和產(chǎn)物合成中的蛋白質(zhì)和多肽的組成成分。在缺少谷氨酰胺時,細胞會生長不良,甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多種生理作用。陜西DMEM高糖培養(yǎng)基采購