SLM）低血清培養(yǎng)基添加1％小牛血清在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng)CHO細(xì)胞生產(chǎn)EOP，可提高收液次數(shù)，每次收液表達(dá)量明顯提高。概述無(wú)血清培養(yǎng)基是用來(lái)在無(wú)血清條件下生長(zhǎng)特殊類型的細(xì)胞或進(jìn)行專門應(yīng)用的培養(yǎng)基。一般是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和替代血清的補(bǔ)充因子組成。無(wú)血清培養(yǎng)基中沒(méi)有添加血清，但含有個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。無(wú)血清培養(yǎng)基與無(wú)蛋白培養(yǎng)基的區(qū)別在于培養(yǎng)基中沒(méi)有添加蛋白，但含有一些動(dòng)物或植物來(lái)源成分，如低分子量肽的水解物。還有一種化學(xué)限定培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中不含有蛋白、水解產(chǎn)物或未知結(jié)構(gòu)的組分，所有成分均有已知的化學(xué)結(jié)構(gòu)。***：1）未知組分少；2）培養(yǎng)基中不存在血清中的抗體、補(bǔ)體等成分，對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞影響小；3）雜蛋白含量少，生產(chǎn)的產(chǎn)品后期處理較容易，例如*苗生產(chǎn)由于人用*苗需要純化減少雜蛋白，純化過(guò)程中成本消耗很大，*苗的損失也很大；4）無(wú)血清培養(yǎng)既可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液的利用率，可以采用發(fā)酵罐培養(yǎng)減少了人力消耗。缺點(diǎn)：目前為止不是所有的細(xì)胞都能在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)。無(wú)血清培養(yǎng)基的某些組分價(jià)格昂貴，導(dǎo)致無(wú)血清無(wú)法工業(yè)推廣的主要原因。DMEM培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。福建減血清培養(yǎng)基是什么

    所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本申請(qǐng)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風(fēng)比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％。新疆MEM a培養(yǎng)基大概價(jià)格多少減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中血清帶來(lái)的變異性。

    擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)6-9d在切口處開(kāi)始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**，在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％。如圖5所示。培養(yǎng)實(shí)例5和對(duì)比培養(yǎng)例5的誘導(dǎo)結(jié)果比較：用上述方法進(jìn)行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％，但cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的愈傷**出愈時(shí)間比ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基提前至少1d；在相同培養(yǎng)條件下，與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比，經(jīng)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)的葉片團(tuán)塊狀愈傷**更大、誘導(dǎo)的根愈傷**更多。如圖5所示。培養(yǎng)實(shí)例6：本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)實(shí)例6與培養(yǎng)實(shí)例5不同的地方在于，步驟(1)將；步驟(2)將2,；步驟(3)所取葉片為本氏***無(wú)菌苗葉片，用手術(shù)剪刀將無(wú)菌葉片剪成，用鑷子將其平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基；步驟(4)所取根為本氏***無(wú)菌苗的根，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚，葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**，愈傷**誘導(dǎo)率為100％，且在愈傷**團(tuán)塊上已開(kāi)始產(chǎn)生多個(gè)嫩綠色的不定芽；本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**。

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，培養(yǎng)基在高溫**的過(guò)程中，其營(yíng)養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級(jí)反應(yīng)來(lái)描述其反應(yīng)速度：式中—表示營(yíng)養(yǎng)成分破環(huán)的速率，C：表示營(yíng)養(yǎng)成分的濃度K'：為反應(yīng)速度常數(shù)，1/s，應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應(yīng)速度常數(shù)，1/S：反應(yīng)的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應(yīng)的***溫度，k同樣，**過(guò)程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫(xiě)成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應(yīng)的溫度從T1升高到T2，其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過(guò)程實(shí)際上是營(yíng)養(yǎng)成分破壞、菌體死亡的兩個(gè)平行性反應(yīng)，對(duì)于平行性反應(yīng)，反應(yīng)溫度的提高，其兩個(gè)平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加，但增加的幅度（大?。﹨s不同，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實(shí)驗(yàn)證明：營(yíng)養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。RPMI1640培養(yǎng)基能夠維持細(xì)胞的代謝活性。

    本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖，a：葉片愈傷**；b：葉片愈傷**誘導(dǎo)率；c：根愈傷**；d：根愈傷**誘導(dǎo)率；a和c中bar＝；圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上，水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖，a：水稻成熟胚愈傷**；b：水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率；a中bar＝；圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖；圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長(zhǎng)狀況的比較效果圖，a：不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無(wú)菌苗生長(zhǎng)情況；b1、c1和d1：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b2、c2和d2：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b3、c3和d3：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b4、c4和d4：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b5、c5和d5：1/；b6、c6和d6：1/；b7、c7和d7：；b8、c8和d8：；a、b、c和d中bar＝；圖10是對(duì)在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(zhǎng)(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的比較效果圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例一，本實(shí)施例廣適性植物**培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno32662mg、。減血清培養(yǎng)基在減少實(shí)驗(yàn)誤差方面表現(xiàn)出色。新疆MEM a培養(yǎng)基大概價(jià)格多少

F12培養(yǎng)基提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)支持。福建減血清培養(yǎng)基是什么

    若應(yīng)用于植物培養(yǎng)中的液體培養(yǎng)基制作，可不用調(diào)節(jié)ph，用超純水(ph為)充分溶解后定容，便可直接應(yīng)用于大多數(shù)植物水培。培養(yǎng)實(shí)例1：哥倫比亞型擬南芥無(wú)菌苗培養(yǎng)(1)種子保存及消毒方法：a、擬南芥種子保存方法：哥倫比亞(col,columbia)型擬南芥種子成熟后，收取種子于，加入3-8顆變色**干燥劑，用封口膜密封后置于4℃長(zhǎng)期保存；b、擬南芥種子**消毒方法：取出經(jīng)低溫干燥保存的種子，于無(wú)菌環(huán)境下，將適量種子置于無(wú)菌，加入適量體積的無(wú)菌水，將離心管顛倒幾次后用低速離心機(jī)離心10s，小心倒掉上清，重復(fù)3次；加入75％酒精，將離心管顛倒幾次后用低速離心機(jī)離心10s，小心倒掉上清；用無(wú)菌水清洗3次，低速離心10s后去除上清；加入適量體積的5％naclo溶液，將離心管上下顛倒10-20次，低速離心10s后倒掉上清，重復(fù)2次；用無(wú)菌水清洗3次，低速離心10s后去除上清；加入無(wú)菌水，使種子完全浸泡在無(wú)菌水中，于4℃放置48h后播種。在種子質(zhì)量良好的情況下，利用上述方法保存及消毒的無(wú)菌擬南芥種子，萌發(fā)率極高且?guī)缀跬瑫r(shí)出苗。(2)生長(zhǎng)培養(yǎng)基配制：1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l，用超純水溶解，。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。福建減血清培養(yǎng)基是什么