在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶(Trypsin)，EDTA等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段，水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，破壞細(xì)胞間的連接，從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在℃時(shí)，胰酶的作用能力**強(qiáng)，因此使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為，而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度（）的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+，從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會(huì)加入一定量的EDTA混合使用，以增強(qiáng)解離效果。但是對(duì)于EDTA可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析時(shí)，推薦選擇不含EDTA的消化液。本產(chǎn)品含有(Trypsin)，溶于無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。為改良型，除了具有方便快速、穩(wěn)定**、細(xì)胞狀態(tài)好等特點(diǎn)之外，消化時(shí)間更短，消化效果媲美進(jìn)口產(chǎn)品，特別適用于難消化的細(xì)胞。 EDTA是一種化學(xué)螯合劑，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子，使細(xì)胞分離。四川國(guó)產(chǎn)胰酶價(jià)格信息

細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶濃度?常見(jiàn)濃度為0.25%的胰酶(含有螯合劑)，半貼壁細(xì)胞或者對(duì)胰酶敏感的細(xì)胞，可采用0.05%濃度的胰酶(含有或者不含有螯合劑)進(jìn)行細(xì)胞消化。由于細(xì)胞膜上的粘附蛋白需要金屬離子維持其活性，常見(jiàn)的胰酶中含有EDTA等整合劑,如果細(xì)胞貼壁不是非常緊密，也可用不含有螯合劑的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。胰酶對(duì)細(xì)胞膜上粘附蛋白的損害比較大，如果進(jìn)行細(xì)胞膜上蛋白的研究，建議選擇溫和的細(xì)胞消化試劑，盡量減少對(duì)細(xì)胞膜上蛋白的損傷。此外，由于胰酶自身也是一種蛋白，胰酶也會(huì)自己剪切自己,建議胰酶不要反復(fù)凍融，拿到手中的大瓶胰酶進(jìn)行分裝使用。除了常見(jiàn)的胰酶(含有或者不含有EDTA)。四川國(guó)產(chǎn)胰酶價(jià)格信息胰蛋白酶屬于其中一種活性成分，主要用于促進(jìn)消化吸收。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

常用的消化酶有:胰酶：用得**多的是胰酶。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)干細(xì)胞種類(lèi)、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的干細(xì)胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于干細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-20度。膠原酶：膠原酶是比較少用的，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下干細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)干細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。胰酶的質(zhì)量是影響干細(xì)胞的消化的關(guān)鍵因素之一，如果配的比較標(biāo)準(zhǔn)，消化的時(shí)候就容易消化，反之就不易消化。還要在你看到消化過(guò)頭的情況下，如果干細(xì)胞下來(lái)的比較多了，這時(shí)可以連同cmf或pbs加上營(yíng)養(yǎng)液一起傳。營(yíng)養(yǎng)液中有血清，胰酶遇到血清就會(huì)自動(dòng)終止消化，但這樣操作對(duì)干細(xì)胞是有一定的影響的。對(duì)于容易消化的干細(xì)胞，加入pbs緩沖液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），棄之，再加入適量胰酶作用10s-40s（根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度），棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將干細(xì)胞消化單細(xì)胞。胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白質(zhì)被胰蛋白酶消化或處理的過(guò)程，因此被稱(chēng)為胰蛋白酶化。

    胰酶使用注意：1、在使用胰酶細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。2、胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。胰酶配制方法：1、培養(yǎng)液配制，方便好用，對(duì)細(xì)胞影響小，并且培養(yǎng)液的ph值正好適合胰蛋白酶的溶解2、生理鹽水配制，要先調(diào)ph值（①胰酶（1：250）②③④⑤⑥⑦Water1000mL磁力攪拌2-3小時(shí)，調(diào)，過(guò)濾除菌。）3、pbs（：稱(chēng)取胰酶粉末，先用少許滅菌過(guò)的PBS調(diào)成糊狀，然后補(bǔ)足到100ml。置室溫?cái)嚢?小時(shí)或冰箱內(nèi)過(guò)夜，過(guò)濾滅菌，分裝，4℃保存?zhèn)溆?。?或是hanks或是D-hanks液配制（1.稱(chēng)取胰蛋白酶粉末置燒杯中，先用少許D-Hanks平衡鹽溶液（）調(diào)成糊狀，然后再補(bǔ)足D-Hanks平衡鹽溶液，攪拌混勻，置室溫4小時(shí)或冰箱過(guò)夜，并不斷攪拌振蕩；2.次日，先用濾紙粗濾，再進(jìn)行過(guò)濾除菌，分裝入瓶中，低溫冰箱保存?zhèn)溆?，常用濃度為。胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可調(diào)用碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至。）一般，至于作用效果，需要消化一次細(xì)胞感覺(jué)一下，因?yàn)椴煌瑥S家的酶不一樣，有的作用溫和，有的作用劇烈。4、是否需要四度放置過(guò)夜，取決于你的胰酶的純度。過(guò)去的胰酶純度不高，所以難以溶解，需要四度過(guò)夜.而現(xiàn)在的胰酶純度都很高。 0.25%胰酶細(xì)胞消化液(含有EDTA，含酚紅)消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。四川國(guó)產(chǎn)胰酶價(jià)格信息

胰蛋白酶是一種胰絲氨酸肽鏈內(nèi)切酶，作用于多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)。四川國(guó)產(chǎn)胰酶價(jià)格信息

品名：0.25%胰蛋白酶溶液，1X分類(lèi)：細(xì)胞消化試劑規(guī)格：100ML用途：消化試劑，如胰蛋白酶，被用于將粘附細(xì)胞從其附著的表面或底物上分離和降解，以及將組織進(jìn)行游離，以開(kāi)展原代細(xì)胞培養(yǎng)。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶（1：250）以及一種新型非哺乳動(dòng)物豬胰蛋白酶替代品，稱(chēng)為T(mén)hermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液，可以快速消化，同時(shí)不損傷細(xì)胞。其非哺乳動(dòng)物配方使它適用于無(wú)血清應(yīng)用，不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使?xì)胞被快速分離，形成單細(xì)胞懸浮物，保持高細(xì)胞活力，并使傳代時(shí)的變異減至**小。四川國(guó)產(chǎn)胰酶價(jià)格信息