2024-11-13 00:16:59
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長,特別是非李斯特氏菌。2.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標準。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎(chǔ)粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌平皿備用。4.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長時,會形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎(chǔ)因其高選擇性和特異性,是檢測食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。甘露醇氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿蠟樣芽孢桿菌在木糖明膠培養(yǎng)基中不發(fā)酵木糖,培養(yǎng)基顏色不變,液化明膠作為典型特征 。
改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)是一種用于微生物學(xué)研究和診斷的培養(yǎng)基,它具有一些特定的特點和用途:1.**選擇性分離培養(yǎng)基**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)主要用于李斯特氏菌的選擇性分離。它通過添加特定的抗生物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制其他非目標微生物的生長,從而促進目標微生物——在這種情況下是李斯特氏菌的生長。2.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括酪胨、多價胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、甘氨酸、氯化鋰和瓊脂等。這些成分為微生物提供了生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境。3.**pH值**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃),這為李斯特氏菌的生長提供了適宜的酸堿環(huán)境。4.**添加物**:在使用時,每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復(fù)達欣,這些添加物有助于抑制其他微生物的生長,提高李斯特氏菌分離的選擇性。5.**高壓滅菌**:在制備過程中,需要將培養(yǎng)基加熱至完全溶解,然后進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保培養(yǎng)基的無菌性。6.**冷卻和添加抗生物質(zhì)**:滅菌后,培養(yǎng)基需要冷卻至50℃,然后在無菌環(huán)境下加入抗生物質(zhì),備用。
BM7培養(yǎng)基(ATCCMedium2870)是一種專門用于培養(yǎng)韌皮桿菌屬(Liberibacter)的微生物培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。以下是BM7培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate):2g-ACES緩沖液(ACES):10g-氫氧化鉀(KOH):3.75g-去離子水(DIWater):550ml-瓊脂(Agar)(如果需要固體培養(yǎng)基):15g-胎牛血清(FetalBovineSerum):150ml-TMN-FH培養(yǎng)基(SigmaT1032):300ml2.**配制方法**:-首先,將上述干粉成分溶解在550ml的去離子水中。-調(diào)節(jié)pH至6.9,并在121°C下高壓滅菌15分鐘。-冷卻后,無菌地加入胎牛血清和TMN-FH培養(yǎng)基。3.**用途**:-主要用于培養(yǎng)和維持韌皮桿菌屬(Liberibacter)的生長。4.**保存條件**:-粉末固體培養(yǎng)基應(yīng)密封保存于陰涼干燥處。-液體培養(yǎng)基應(yīng)在2-8°C下避光保存。5.**注意事項**:-配制過程中應(yīng)避免吸入、攝入或皮膚接觸。-應(yīng)在通風櫥中進行配制,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備,如口罩、手套和護目鏡。這種培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著重要的應(yīng)用,尤其是在研究和診斷與韌皮桿菌相關(guān)的植物疾病方面。TSFA含有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、瓊脂和脫脂奶粉等成分,為嗜冷菌提供碳源、氮源、維生素和生長因子。
葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(DextroseBroth)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,它主要含有蛋白胨、牛肉膏粉、氯化鈉和葡萄糖等成分。這種培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。**特點介紹**:1.**營養(yǎng)成分**:葡萄糖肉湯培養(yǎng)基含有的蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子,氯化鈉維持滲透壓,而葡萄糖則提供碳源。2.**應(yīng)用范圍**:它適用于營養(yǎng)要求高的細菌培養(yǎng),特別是用于一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢測和腸桿菌科細菌的葡萄糖產(chǎn)氣試驗。3.**制備方法**:一般操作是稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱攪拌煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌。4.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進行測試,可以確保培養(yǎng)基支持目標菌株的生長。例如,乙型溶血性鏈球菌ATCC21059在該培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長,而大腸埃希氏菌ATCC25922則用于測試培養(yǎng)基的特異性。葡萄糖肉湯培養(yǎng)基因其營養(yǎng)均衡和制備簡單,被用于微生物實驗室進行細菌的分離、鑒定和培養(yǎng)研究。某些細菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時變色(通常為粉紅色)。Brewer厭氧菌瓊脂培養(yǎng)皿
TGC液體培養(yǎng)基不僅用于無菌試驗,還可用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌總數(shù)的測定。YPD培養(yǎng)基培養(yǎng)皿
氧化三甲胺(TMAO)培養(yǎng)基是一種專門用于培養(yǎng)和研究某些特定微生物的培養(yǎng)基,尤其是在厭氧菌和一些具有特定代謝途徑的細菌的研究中。以下是TMAO培養(yǎng)基的一些特點:1.**促進特定微生物生長**:TMAO培養(yǎng)基含有氧化三甲胺作為關(guān)鍵成分,能夠刺激某些厭氧菌的生長速率和產(chǎn)量,如在胰蛋白胨/酵母提取物培養(yǎng)基中加入TMAO,可以促進葡萄糖的摩爾生長產(chǎn)量翻倍。2.**作為末端電子受體**:TMAO在厭氧菌的代謝過程中充當末端電子受體,促進非氧化菌在無氧條件下的生長。3.**微生物代謝研究**:TMAO培養(yǎng)基用于研究微生物如何將TMAO分解為三甲胺(TMA),這一過程對理解微生物的代謝途徑至關(guān)重要。4.**影響培養(yǎng)基理化性質(zhì)**:微生物在TMAO培養(yǎng)基中的生長可以影響培養(yǎng)基的電導(dǎo)率和pH值,這些變化可以用于監(jiān)測微生物的代謝活動。5.**與心血管疾病相關(guān)**:TMAO和其前體物質(zhì)TMA在心血管疾病中的作用引起了關(guān)注,TMAO培養(yǎng)基有助于研究這些代謝物在疾病發(fā)展中的作用。6.**微生物群落影響**:TMAO的代謝與腸道微生物群落的組成和功能密切相關(guān),TMAO培養(yǎng)基可以用于研究腸道微生物如何影響宿主的代謝和健康。YPD培養(yǎng)基培養(yǎng)皿