2024-11-04 02:04:54
半固體儲存培養(yǎng)基是一種在微生物學研究和細胞培養(yǎng)領域中扮演重要角色的培養(yǎng)基。它主要用于觀察微生物的動力、菌種的保藏與運輸、厭氧菌的培養(yǎng)、菌種鑒定、細胞培養(yǎng)、噬菌體效價測定以及微生物趨化性研究等。半固體培養(yǎng)基通常由液體培養(yǎng)基加入少量凝固劑制成,例如瓊脂的用量在0.2~0.7%之間。在具體應用上,半固體培養(yǎng)基可以用于以下方面:1.**微生物動力觀察**:通過推測細菌是否有鞭毛來進行鑒定。2.**菌種保藏與運輸**:便于菌種的短時間保存和長途運輸。3.**厭氧菌培養(yǎng)**:適用于厭氧菌的培養(yǎng),對于研究厭氧微生物的生長和代謝至關重要。4.**菌種鑒定**:通過觀察菌落的形態(tài)和生長特性來區(qū)分不同的微生物種類。5.**細胞培養(yǎng)**:在細胞生物學領域,半固體培養(yǎng)基廣泛應用于干細胞、細胞克隆、細胞表達和細胞毒性等實驗。6.**噬菌體效價測定**:用于雙層平板法測定噬菌體的效價,是研究病毒與宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趨化性研究**:幫助研究微生物的趨化性,即微生物對化學物質(zhì)的定向移動反應。CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。氯化鈉營養(yǎng)瓊脂平板
TYCSB培養(yǎng)基基礎(TryptoneYeastCystineSucroseBacitracinMediumBase)是一種用于分離和培養(yǎng)特定細菌的選擇性培養(yǎng)基。它的特點包括:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母膏粉、L-胱氨酸鹽酸鹽、亞硫酸鈉、氯化鈉、無水磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等,瓊脂作為凝固劑。這些成分為細菌提供氮源、碳源、維生素和生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:添加的桿菌肽(Bacitracin)可以抑制革蘭氏陰性菌的生長,有助于選擇性地分離革蘭氏陽性菌,特別是鏈球菌和腸球菌。4.**應用**:主要用于變異鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離和培養(yǎng),也適用于其他鏈球菌和腸球菌的分離。5.**配制方法**:通常稱取培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。6.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進行測試,確保培養(yǎng)基支持目標菌株的生長,同時抑制非目標菌株。7.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應密封保存在陰涼干燥處,配制好的培養(yǎng)基應保存在2-8°C。8.**結果觀察**:在TYCSB培養(yǎng)基上,可以觀察到細菌的生長情況,用于進一步的鑒定和分析。Meclary預裝培養(yǎng)皿通過接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、普通變形桿菌和鼠傷寒沙門氏菌等,培養(yǎng)后觀察菌落生長。
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養(yǎng)細菌的計數(shù)。它適用于細菌總數(shù)的測定,也可用于檢測乳品中的耐熱細菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子,葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養(yǎng)基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌,然后用于微生物的培養(yǎng)。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當細菌代謝時,TTC會被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細菌的生長情況。7.**保存條件**:未開封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開封后應旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊,并根據(jù)存放條件適當延長保存期。
胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)是一種常用的微生物固體培養(yǎng)基,廣泛應用于各種細菌的分離和培養(yǎng)。以下是TSA培養(yǎng)基的一些關鍵特點:1.**成分**:TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化鈉(5g/L)和瓊脂(15g/L),這些成分為細菌提供氮源、維生素、生長因子以及維持滲透壓和凝固培養(yǎng)基。2.**pH值**:TSA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.3±0.2(25℃),以滿足大多數(shù)細菌生長的需要。3.**用途**:TSA培養(yǎng)基適用于多種細菌的培養(yǎng),包括非選擇性增菌培養(yǎng)及用于阪崎腸桿菌的純化培養(yǎng)和產(chǎn)黃色素試驗。4.**制備方法**:將TSA培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解,通常分裝到試管或平皿中,經(jīng)過高壓滅菌后備用。5.**保存條件**:未開封的TSA培養(yǎng)基通常在室溫下避光保存,保質(zhì)期可達三年。開封后應旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊,并根據(jù)存放條件適當延長保存期。6.**注意事項**:在稱量和操作過程中應注意無菌操作,避免微生物污染。使用后應立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。粉塵可能引起呼吸道不適,操作時應佩戴口罩。7.**應用**:TSA培養(yǎng)基在微生物學研究、醫(yī)學診斷、食品檢測和環(huán)境保護等領域有廣泛應用。CASO AGAR+20g/L尿素是一種用于巴氏芽孢桿菌的培養(yǎng)基,其成分包括酪蛋白胨、氯化鈉和瓊脂,pH值為7.3 。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。除了用于分離血鏈球菌外,TYC培養(yǎng)基也可以用于制備變形鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑,pH值調(diào)整至7.3±0.2(25℃)。TYC培養(yǎng)基通過其成分提供了細菌生長所需的氮源、碳源、維生素和生長因子。其中,L-胱氨酸和亞硫酸鈉有助于抑制某些非目標細菌的生長,而促進目標鏈球菌的生長。此外,TYC培養(yǎng)基也可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加其選擇性。在實驗室中,TYC培養(yǎng)基通常按照以下方法配制:1.稱取98.0g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。4.滅菌結束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.如有需要,培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時,可選擇性添加過濾除菌的桿菌肽0.2U/ml以增加選擇性。TYC培養(yǎng)基在微生物學研究和臨床診斷中具有重要應用,特別是在口腔微生物的檢測和研究中。CVT瓊脂培養(yǎng)基主要用于乳制品中嗜冷菌的計數(shù),也可用于其他樣品中嗜冷菌的分離和計數(shù) 。毛蘚菌瓊脂2號平板
通常將卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。氯化鈉營養(yǎng)瓊脂平板
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細菌,與齲齒的形成有關。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時,需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標細菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對營養(yǎng)要求較高的細菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。氯化鈉營養(yǎng)瓊脂平板